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蛋白純化技術(shù)的革新
日期:2024-11-22 01:47
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摘要:
蛋白純化技術(shù)的革新
一般來說,不同的組織或細(xì)胞中可能同時(shí)存在多種蛋白質(zhì),蛋白的含量也不盡相同,因此,若生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中要對(duì)某一特殊蛋白質(zhì)進(jìn)行研究,首先要選擇合適的細(xì)胞來表達(dá)這蛋白,再對(duì)其進(jìn)行蛋白分離純化,蛋白純化工作非常復(fù)雜,除了需要實(shí)驗(yàn)者的細(xì)致和耐心之外,還需要選擇合適的純化系統(tǒng)。*常被使用的是蛋白親和層析法(affinity chromatography),一般分為以下步驟:
1. 選擇適合標(biāo)簽來標(biāo)記目標(biāo)蛋白
2. 將目標(biāo)蛋白溫和的從原來的組織或細(xì)胞中以裂解出來,使其與適當(dāng)?shù)呐潴w結(jié)合。
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蛋白純化技術(shù)的革新
一般來說,不同的組織或細(xì)胞中可能同時(shí)存在多種蛋白質(zhì),蛋白的含量也不盡相同,因此,若生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中要對(duì)某一特殊蛋白質(zhì)進(jìn)行研究,首先要選擇合適的細(xì)胞來表達(dá)這蛋白,再對(duì)其進(jìn)行蛋白分離純化,蛋白純化工作非常復(fù)雜,除了需要實(shí)驗(yàn)者的細(xì)致和耐心之外,還需要選擇合適的純化系統(tǒng)。*常被使用的是蛋白親和層析法(affinity chromatography),一般分為以下步驟:
1. 選擇適合標(biāo)簽來標(biāo)記目標(biāo)蛋白
2. 將目標(biāo)蛋白溫和的從原來的組織或細(xì)胞中以裂解出來,使其與適當(dāng)?shù)呐潴w結(jié)合。
3. 進(jìn)行數(shù)次清洗,將其它雜蛋白移除。
4. 將目標(biāo)蛋白從配體上洗脫下來。
實(shí)驗(yàn)步驟看似簡(jiǎn)便,但其中所需細(xì)致和精力只有參與實(shí)驗(yàn)的研究人員才能體會(huì),您是否厭倦了蛋白純化后的雜帶?厭倦了為一個(gè)純化流程調(diào)配多種不同的緩沖液溶劑?厭倦了為了后續(xù)實(shí)驗(yàn)需要在目標(biāo)蛋白上接入多種標(biāo)簽?
第三代Strep-tag®系統(tǒng):「Strep-Tactin®XT:Twin-Strep-tag®」蛋白純化系統(tǒng),能有效提升您目標(biāo)蛋白的純度,解決您實(shí)驗(yàn)中所遇到的常見問題。
STREP-TACTIN®XT:目標(biāo)蛋白純度>95%
純化出純度極高的融合蛋白是Strep-tag®系統(tǒng)的*主要特點(diǎn),優(yōu)于其他親和純化系統(tǒng),如常見的His-tag。上圖展現(xiàn)了STREP-TACTIN®XT的純化程序,利用第三代Strep-tag®系統(tǒng)僅需進(jìn)行一次純化程序,不需另使用其他純化手續(xù)就可得到高純度的目標(biāo)蛋白。而新一代的Strep-tag®系統(tǒng),因Strep-Tactin®XT與Twin-Strep-tag®的**親和力,還可應(yīng)用于變性條件下的純化、批量純化、高通量篩選等領(lǐng)域。
STREP-TACTIN®XT:高效率的固定目標(biāo)蛋白
由于Strep-Tactin®XT與Twin-Strep-tag®間的親和力**,第三代Strep-tag®系統(tǒng)能夠高效率的固定目標(biāo)蛋白,純化后能直接將其固定在您所需的介面上,不需另外使用其他親和標(biāo)簽!
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